به کارگیری روش real time rt-pcr با استفاده از رنگ سایبرگرین به منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (hiv-۱) و مقایسه نتایج به دست آمده با نتایج حاصل از روش کوباس آمپلی کور

نویسندگان

saeid amel jamehdar

department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran farzaneh sabahi

department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mahdi forouzandeh

department of biotechnology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mahboubeh haji abdolbaghi

department of infectious diseases, aids research center of iran, faculty of medicine, tehran university of medical sciences, tehran, iran anooshiravan kazemnejad

چکیده

هدف: در این تحقیق روش real time rt-pcrبا استفاده از رنگ سایبرگرین به منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (hiv-1) راه اندازی شد. مواد و روش ها: ایـن آزمایش بر اســاس تــکثیر ناحیه ژن pol ویروس بوده و از دستگاه ترموسایکلرabi 7500 استفاده شد. 26 بیمار مبتلا به hiv-1 با این روش مطالعه شدند و سپس نتایج با آزمون تجارتی استاندارد کوباس آمپلی کور مونیتور تست (cobas amplicor hiv-1 monitor test)مقایسه شد. نتایج: نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که این روش قادر به اندازه گیری حداقل 500 کپی از hiv-1 rna در هر میلی لیتر است. علاوه بر این، آزمایش در محدوده 5-109×5 کپی از rna ویروس در هر میکرو لیتر خطی است. از آنجایی که در هیچ کدام از افراد کنترل هیچگونه علامت مثبتی نشان داده نشد، ویژگی این روش 100 درصد محاسبه شد. اندازه گیری کمی hiv-1 در بیماران با استفاده از روش راه اندازی شده و روش استاندارد نشان داد که همبستگی بسیار خوبی بین دو روش وجود دارد (95/0=r2). نتیجه گیری: بر اساس آخرین اطلاعات موجود، شیوع hiv در جمهوری اسلامی ایران در یک وضعیت هشدار دهنده در حال افزایش است. از آنجایی که سطح پلاسمایی ویروس، مؤثرترین شاخص برای بررسی درمان بیماری است، اندازه گیری سطح پلاسمایی hiv-1 ابزار بسیار مهمی برای پیگیری فعالیت ویروس در افراد آلوده است. در این راستا راه اندازی و توسـعه روش های اندازه گیری hiv-1 rna ابـزار منحصر به فـردی است که به پـزشک برای آگاهی از وضعیت درمان در بیمارانی که تحت درمان ضد رتروویروسی قرار گرفته اند کمک می کند. در این تحقیق روشsybr-green real time rt-pcr را به منظور سنجش کمی hiv-1 در بیماران آلوده راه اندازی شد. از آنجایی که در این روش از rna استاندارد سنتز شده استفاده شد، محدوده شناسایی بالادست در این روش بسیار بالاتر از روش استاندارد بود (109 ×5 در مقابل 105×5/7). بنابراین اگر نیازی به محدوده دینامیکی گسترده تری باشد- مانند موارد حاد بیماری- این استاندارد مفید خواهد بود. در این تحقیق تکرارپذیری در سطح درون سنجش (intra assay) و بین سنجش (inter assay) بررسی شد. ضریب تغییرات ct به دست آمده در آزمون تکرارپذیری درون سنجش و بین سنجش به ترتیب کمتر از 3 و 5/4 درصد بود که نشان می دهد این روش تکرارپذیری بالایی دارد. با توجه به نتایج به دست آمده روش راه اندازی شده، می تواند جایگزین مناسبی برای روش استاندارد در سنجش کمی hiv-1 باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

راه‌اندازی روش RT-Nested PCR به منظور تشخیص ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک

  چکید ه   سابقه و هدف   ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک( HIV-1 ) عامل ایجاد کننده سندرم نقص ایمنی اکتسابی انسانی”ایدز” می‌باشد. انتقال بیماری از طریق انتقال خون در دوره پنجره، در مراکز انتقال خون یک معضل جهانی محسوب می‌شود. علاوه بر این، نیاز مبرمی برای تشخیص سریع، حساس و دقیق عفونت HIV-1 قبل از ظهور آنتی‌بادی در بدن فرد آلوده در بیمارستان‌ها و مراکز بهداشتی احساس می‌شود. تشخیص ژنوم ویروس HIV-1...

متن کامل

به کارگیری روش NASBA Real-time با استفاده از Molecular Beaconبرای تشخیص ویروس HCV

  چکید ه   سابقه و هدف   هپاتیت C ، شایع‌ترین بیماری ویروسی قابل انتقال از طریق خون، در میان معتادان تزریقی می‌باشد. در مطالعه حاضر یک روش تکثیر اسید نوکلئیک هم‌دما (NASBA) در ترکیب با روش Real-time بر اساس پروب Molecular Beacon برای ردیابی ویروس HCV مورد استفاده قرار گرفت.   مواد و روش‌ها   در یک مطالعه تجربی، طراحی جفت آغازگر و پروب برای ناحیه حفاظت شده 5'NCR ویروس HCV به طول bp 241 با نرم‌اف...

متن کامل

سنجش نسبت بیان HOXB13:IL17BR در بیماران مبتلا به سرطان پستان به روش qRT-PCR با استفاده از رنگ سایبرگرین

زمینه و هدف: مطالعات نشان داده اند نسبت بیان HOXB13:IL17BR، شاخص پیشگویی پیامدهای کلینیکی در بیماران مبتلا به سرطان پستان با تومورهای استروژن رسپتور مثبت و عدم درگیری غدد لنفاوی تحت درمان با تاموکسیفن است. تمام این آزمایشات با روش qReal Time RT-PCR با استفاده از پروب TaqMan انجام شدند. هدف پژوهش حاضر سنجش این نسبت با روش qReal Time RT-PCR با استفاده از سایبرگرین بود. روش بررسی: در این مطالعه ی ...

متن کامل

راه اندازی و به کارگیری یک روش multiplex real-time rt-pcr حساس برای تشخیص همزمان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع ۱ و ویروس هپاتیت c در نمونه های پلاسما

زمینه و هدف: ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت c از جمله مهم‎ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون محسوب می شوند و از این رو تشخیص صحیح، دقیق و حساس این ویروس ها در افراد آلوده و خون های اهدایی از اهمیت بسیاری برخوردار است. به علت وجود برخی از محدودیت های روش های سرولوژیک در تشخیص این عوامل عفونی، هدف این مطالعه استفاده از روش های مولکولی سریع و حساس همچون real-time pcr می‎باشد. مو...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۰، شماره Summer ۲۰۰۸، صفحات ۴۳-۵۰

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023